RNA干扰CREB对缓激肽作用的胶质瘤细胞IL-1β分泌的影响

摘要：

目的 探讨转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)的磷酸化是否介导了缓激肽刺激大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β (IL-1β)的表达.方法 利用RNA干扰(RNAi)技术,以CREB为靶基因,将体外化学合成的CREB序列特异性双链小干扰RNA (siRNA)和无关序列的siRNA分别与Lipofectamine2000结合后转染细胞,用Western blot分析CREB蛋白的表达水平.利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测CREB siRNA转染前后,缓激肽诱导C6胶质瘤细胞IL-1β mRNA及细胞培养上清液中IL-1β的表达水平.结果 CREB序列特异性siRNA转染细胞72 h后,可较强的抑制CREB蛋白的表达,而无关序列的siRNA对CREB蛋白表达水平无明显的抑制作用.RT-PCR和放射免疫法结果均显示CREBsiRNA干预C6细胞后,并未改变缓激肽刺激IL-1β表达的能力.结论 化学合成的siRNA可有效抑制C6胶质瘤细胞中CREB的表达,CREB可能未参与缓激肽刺激C6细胞IL-1β表达的信号转导过程.

关键词：RNA干扰、神经胶质瘤、CREB、缓激肽、白细胞介素-1β

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分类号：R730.264(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30670723;30600060;30400145;30570650;辽宁省自然科学基金20052102;教育部高等学校博士学科点专项科研基金20050159005

在线出版日期：2007-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：235-238