NIH3T3细胞核内过表达的M-CSF对细胞运动的影响

摘要：

目的 构建M-CSF细胞核内定位表达载体pCMV/M-CSF,探讨核内M-CSF对NIH3T3细胞运动的影响.方法 采用PCR的方法扩增人M-CSF活性片段,将其插入核内真核表达载体pCMV/myc/nuc,构建重组体pCMV/M-CSF,经脂质体介导转染NIH3T3细胞,G418筛选后,用免疫细胞化学及Western blot鉴定其在真核细胞中的表达及定位分布,用细胞划痕实验测定M-CSF进入细胞核后对细胞运动能力的影响.结果 限制性双酶切及DNA测序分析结果显示插入pCMV/M-CSF的片段为1400bp左右,与预期M-CSF分子大小相当.Western blot结果显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞能稳定表达M-CSF蛋白;免疫细胞化学结果显示表达的M-CSF定位于NIH3T3细胞核.细胞划痕实验显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞有较强的运动能力.结论 成功构建M-CSF核内定位表达载体pCMV/M-CSF,核内M-CSF可加强NIH3T3细胞运动.

关键词：巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、核内定位载体pCMV/myc/nuc、NIH3T3细胞、细胞运动

所属期刊栏目：13

分类号：R730.231(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30270684;湖南省杰出青年科学基金02JJYB004

在线出版日期：2007-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：230-234