丙型肝炎病毒NS3基因真核质粒的构建及其在人肝细胞中的诱导表达

摘要：

目的:进行丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因真核表达载体的构建,并分析其在体外培养的人肝细胞中的表达.方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011表达载体中PCR扩增出HCV NS3基因片段,将其与表达载体pcDNA3.1(-)重组,得到重组的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3.然后采用阳离子多聚体将其转染人肝细胞QSG7701,以免疫组织化学SP法及Western Blotting检测HCV NS3蛋白的表达.结果:所得到的NS3片段正确,序列正确,所构建的真核质粒成功转染QSG7701细胞并表达蛋白,表达的NS3蛋白相对分子质量为70 000.结论:成功构建了丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3,并且该载体在体外培养的人肝细胞中能有效表达特异性HCV NS3蛋白.

关键词：丙型肝炎病毒、非结构蛋白、蛋白表达

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分类号：R392.11

资助基金：教育部留学回国人员科研启动基金教外司[2000]479;广东省自然科学基金粤科基办[2001]10-010371

在线出版日期：2005-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：495-501