Rv3872/CFP-10/ESAT-6融合蛋白的人工合成及表达

摘要：

根据牛分枝杆菌AF2122/97基因组中Rv3872、CFP-1O和ESAT-6全长基因序列,以柔性linker(G4S)3,将三基因序列进行串联,形成表达基因盒(Rv3872-CFP1O-ESAT6,RCE),人工合成并克隆于PUC57转移载体上(PUC57-RCE).经EcoRI和HindⅢ双酶切PUC57-RCE,回收纯化RCE片段,与经过相同双酶切的pET-28a载体,于16℃水浴连接过夜,连接产物转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,重组质粒经培养鉴定,测序结果证实插入的REC片段序列编码和方向与预期一致.在优化的诱导条件下表达蛋白,分段收集样本,并各取少量进行SDS-PAGE,经Western-blot分析显示,融合蛋白RCE具有较好的免疫原性,与阳性牛血清在35kDa位置处有明显的反应带.

关键词：奶牛结核病、融合蛋白、Rv3872/CFP-10/ESAT-6、人工合成、表达

分类号：R73;R37

在线出版日期：2013-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：33-35