SETD2在猪卵母细胞体外成熟中的作用
SETD2是H3K36me3特异性甲基转移酶,参与组蛋白甲基化修饰,并通过调节多种基因的表达影响细胞功能.为探究SETD2在猪卵母细胞体外成熟(invitro maturation,IVM)过程中的表达规律及作用,通过免疫荧光染色检测SETD2及H3K36me3在猪卵母细胞IVM过程中各个时期(GV、MⅠ、MⅡ期)的表达定位情况;在GV期显微注射SETD2干扰RN A(SETD2-siRNA)构建干扰模型,检测干扰后对SETD2、H3K36me3、DNA双链断裂标志物(γH2AX)以及第一极体(PBI)排出率的影响;通过qPCR技术检测干扰后对DNA甲基化转移酶DNMT3B、凋亡和抗凋亡相关基因BAX、BCL2表达的影响.结果表明:SETD2信号GV期聚集在DNA周围,M Ⅰ和MⅡ期均在细胞质中表达,而H3K36me3在整个减数分裂过程中均与核共定位;进一步研究发现,SETD2-siRNA干扰后显著降低了 SETD2和H3K36me3表达水平,增加了γH2AX表达(P<0.05),同时显著降低PBI排出率(P<0.05);qPCR结果显示,SETD2-siRN A干扰后DNMT3B表达差异不显著,但BCL2表达水平显著下降,凋亡相关基因BAX显著升高(P<0.05).说明SETD2在卵母细胞体外成熟中起着重要作用,SETD2-siRNA干扰后降低H3K36me3甲基化水平,导致DNA断裂增加,引起细胞凋亡,影响猪卵母细胞IVM成熟效率及质量.
SETD2、猪卵母细胞、H3K36me、DNA损伤
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S862(狩猎、野生动物驯养)
吉林省科技发展计划项目;吉林省教育厅项目;国家自然科学基金
2023-07-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
365-371