SerpinB6 b过表达载体的构建及对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响
试验构建丝氨酸蛋白酶抑制剂亚家族成员6b(Serine peptidase inhibitor,clade B,member 6b,SerpinB6b)基因过表达载体,研究其对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响.根据GenBank中已发表的SerpinB6b基因序列,设计含酶切位点的特异性引物,PCR扩增并与pGEM-T载体连接,经限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,与pcDNA3.1(+)载体融合得到SerpinB6b过表达载体.将其转染到体外分离培养的小鼠子宫基质细胞,利用荧光定量PCR法检测子宫基质细胞中SerpinB6b mRNA表达的变化,以及SerpinB6b过表达后蜕膜化标志分子Prl8a2和Prl3c1表达的变化,对照组转染pcDNA3.1(+)空载体.结果表明:SerpinB6b过表达载体经双酶切鉴定后,结果与目的基因条带吻合,测序结果与GenBank中小鼠SerpinB6b基因序列同源性为100％.与对照组相比,转染SerpinB6b过表达载体后,SerpinB6b在小鼠子宫基质细胞中的表达显著升高.同时,过表达SerpinB6b可明显促进蜕膜化标志分子Prl8a2和Prl3c1 mRNA的表达.提示SerpinB6b可能在小鼠子宫基质细胞蜕膜化过程中起重要的调节作用.
SerpinB6b、载体构建、蜕膜化、子宫、小鼠
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S814;S852.1(普通畜牧学)
国家自然科学基金项目31672503,31472158;吉林大学研究生创新基金项目2017085
2019-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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