多环芳烃-菲单克隆抗体制备及鉴定

摘要：

为快速、准确检测环境中的菲(Phe),研究制备了抗菲单克隆抗体,并分析了抗菲单克隆抗体的免疫学特性.采用活泼酯法将2-菲丁酸与载体蛋白(BSA、OVA)共价连接制备免疫抗原(Phe-BSA)和检测抗原(Phe-OVA).通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外扫描图谱分析及计算偶联比验证偶联结果.采用足垫法免疫Balb/C小鼠,利用细胞融合技术、阳性杂交瘤筛选及克隆制备出抗菲单克隆抗体.结果表明:完全抗原制备成功,获得1株能稳定分泌抗Phe抗体的杂交瘤细胞株1G7,纯化后抗体效价为1∶6.4×105,亲和力常数为3.29×108 L/mol.该单克隆抗体亚型为IgG1,对Phe的IC50值为17.82 ng/mL,与5种多环芳烃具有交叉反应,可用于对环境中多种PAHs的广谱检测.

关键词：菲、完全抗原、单克隆抗体、免疫学特性

所属期刊栏目：39

分类号：S851.2;X503(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目61571208;吉林省科技发展计划项目20140101012JC;粮油食品深加工吉林省高校重点实验室开放资金项目2016019;吉林工商学院科学技术研究项目LZ2016007

在线出版日期：2017-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：306-312