恶性疟原虫肝素结合蛋白质PF3D7_1104400的原核表达与多克隆抗体的制备

摘要：

为研究肝素结合蛋白质PF3D7_1104400的功能以及其作为疟疾疫苗候选抗原的可行性,通过PCR方法扩增目的基因,并将其与pET-28a和pGEX-4T-1表达载体连接构建重组表达质粒.将构建成功的重组表达质粒转化入大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL中诱导表达,利用亲和层析的方法纯化His-tag和GST-tag重组蛋白质.用His-tag重组蛋白质免疫家兔制备多克隆抗体,以该抗体为一抗,利用Western blot检测该抗体的特异性以及PF3D7_1104400蛋白质在虫体内是否表达.结果表明:成功构建重组表达质粒PF3D7_1104400-pET和PF3D7_1104400-pGEX,诱导表达并纯化出特异性好、纯度高的重组蛋白.制备的多克隆抗体能够特异性识别虫体天然蛋白,PF3D7_1104400蛋白质在恶性疟原虫体内全长表达.

关键词：恶性疟原虫、肝素、原核表达、多克隆抗体、疫苗候选抗原

所属期刊栏目：39

分类号：S855.99(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目81130033

在线出版日期：2017-05-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：100-105