恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的原核表达及多克隆抗体的制备

摘要：

为研究恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)3D7株AP核酸内切酶(AP endonuclease)的功能,通过PCR的方法扩增PF3D7_0305600(292～1137 bp),构建克隆载体.测序正确后,将该片段插入到pET-28a和pGEX-4T-1,构建重组表达载体pET-28a-Ae、pGEX-4T-1-Ae.将表达载体转入BL21-CodonPlus表达重组蛋白r-Ae-His和r-Ae-GST,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,r-Ae-His免疫家兔制备多克隆抗体,并用ELISA检测抗血清效价,Western blot检测抗体特异性.结果表明:表达的r-Ae-His分子量约为39 ku,r-Ae-GST分子量约为60 ku.制备的多克隆抗体能够特异性地识别天然蛋白,可用于恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的后续研究.

关键词：恶性疟原虫、AP核酸内切酶、基因克隆、多克隆抗体、药物靶点

所属期刊栏目：38

分类号：S855.99(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目81130033

在线出版日期：2016-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：346-349,356