狂犬病病毒G蛋白昆虫细胞表达及其生物信息学分析
利用RT-PCR方法从SRV9株细胞毒基因组RNA扩增G蛋白基因,然后将其克隆到pMD18-T载体上,将得到的重组克隆质粒SRV9G-pMD18T进行PCR和测序鉴定.结果表明:克隆的基因全长为1 609 bp,阅读框正确;将此SRV9株G基因亚克隆到供体质粒pFastBacDual后获得了重组供体质粒SRV9G-pFastBacD-ual;进而将重组供体质粒转化DH10Bac感受态细胞,经2次抗性、蓝白斑筛选及PCR分析后,获得重组穿梭质粒SRV9G-Bacmid;将其转染Sf9细胞48 h后,通过细胞形态学和重组杆状病毒负染电镜观察显示,杆状病毒转染成功;通过Western blot检测显示,Sf9细胞成功表达了SRV9 G蛋白.随后,利用ExPASy服务器上的在线分析工具和生物信息学分析软件DNAStar对G蛋白的基本性质进行了分析.试验采用昆虫细胞Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,成功表达出G蛋白,并对其进行了生物信息学分析,为蛋白纯化及狂犬病诊断试剂盒的进一步研制奠定了基础.
狂犬病病毒G蛋白、杆状病毒表达系统、生物信息学分析、SRV9株
38
S852.65(动物医学（兽医学）)
国家科技基础条件平台建设计划项目2011ZXJ09201-031,公益性行业农业科研专项201103032
2016-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
228-234
