大豆 HSP17.4Ⅲ基因克隆及植物表达载体的构建?
大豆子房作为成熟花器官的重要组成部分，发育初期对子房内细胞分裂数有着重要的影响，可能直接影响子粒发育以及品质形成，因此对子房特异表达基因的研究将可能为多粒荚形成的分子基础提供依据。该研究以大豆多粒荚突变体为试验材料，选取上调表达差异显著的 HSP17?4Ⅲ基因为目标基因，通过RT－PCR扩增HSP17?4Ⅲ基因全长CDS序列，编码序列与NCBI中HSP17?4Ⅲ基因序列相似性为99％。双酶切连入表达载体pCAMBIA3300，构建超表达载体；亚克隆法扩增该基因246 bp大小的核心保守序列，依次将其正义片段、功能性间隔序列Intron－SSR和反义片段双酶切连接到中间载体pBluescript SK，再利用BamHⅠ和SacⅠ双酶切将其整个干扰元件连入表达载体pCPB上，构建RNA干扰植物表达载体。质粒PCR、酶切鉴定以及测序结果表明，成功构建了超表达载体pCPB－QC3和RNA干扰植物表达载体pCPB－ZSF－RNAi，为研究HSP17?4Ⅲ蛋白在大豆子房中的功能奠定基础。
大豆、子房、基因、热激蛋白、超表达载体、RNAi表达载体
S336;Q78(作物遗传育种与良种繁育)
转基因生物新品种培育重大专项2014ZX08004－004－003－001;吉林省重点科技攻关项目20140204021NY
2016-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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