猪瘟病毒2．1b基因亚亚型野毒株的体外细胞传代适应与全基因组序列分析?
利用RT－PCR从广东某猪场疑似猪瘟（ Classical swine fever， CSF）病例中检测出CSFV，并对扩增的E2全长基因进行了序列测定和系统进化分析。结果表明：引发该起猪瘟疫情的毒株属于CSFV 2?1b基因亚亚型，命名为GD176。为了进一步了解该毒株的复制特点，利用PK－15细胞对GD176进行了体外细胞适应性传代，并对获得的细胞适应毒GD176?F46进行了全基因组测序。结果表明：GD176通过在PK－15上不断传代，最终获得了高滴度的适应毒株，其滴度从第6代的102?61 TCID50／mL提高至第46代的108?06 TCID50／mL。病毒生长动力学结果显示，GD176?F46在感染后72 h病毒滴度达到最高值（108?17 TCID50／mL）。为进一步分析GD176在细胞传代适应过程中的稳定性，对不同代次细胞毒的E2全长基因进行扩增和序列测定，结果发现：GD176?F0与GD176?F6、F10、F15、F20、F25、F30、F35、F40和F46的E2基因序列完全一致，这表明囊膜蛋白E2在病毒适应PK－15细胞过程中非常稳定。通过比对GD176和其他2?1亚型毒株各蛋白的氨基酸序列发现，不同毒株之间同源性最小的病毒蛋白是NS5A，低于病毒囊膜糖蛋白E2。获得了高度适应PK－15细胞的GD176细胞毒，为进行病毒毒力评价、复制和致病特性研究奠定了基础。
猪瘟病毒、2?1b亚亚型、细胞适应性传代、全基因组
S852.651(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金重点项目31130052;中国博士后科学基金面上项目2013M532129
2015-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
605-611
