应用Intein融合的鸡IL-2蛋白制备多克隆抗体

摘要：

研究Intein标签与目的蛋白chIL-2融合作为抗原,进行高效价兔抗chIL-2蛋白多克隆抗体的制备,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366 bp)克隆连接到pTYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362 bp的Intein基因融合在同1开放阅读框内,编码分子量约为71 ku的chIL-2-Intein融合蛋白.诱导表达chIL-2-Intein融合蛋白,应用Chitin-Sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化.用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体.应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western Blot分析抗体特异性.结果表明:应用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测.

关键词：内肽酶、鸡白介素-2、pTYB1、多克隆抗体

所属期刊栏目：37

分类号：Q785;S831.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31272528,教育部新世纪优秀人才支持计划项目NCET-12-0232,教育部留学回国人员科研启动基金项目[教外司留2013693号]

在线出版日期：2015-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：368-374