结核分枝杆菌酯酶Rv1400c原核表达及表达产物的酶活性分析?
为探究结核分枝杆菌酯酶Rv1400c活性，以进一步研究Rv1400c的结构和功能。以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板，对 Rv1400c 基因进行扩增，并将其克隆到 pET28b （＋）原核表达载体上，构建pET28b－Rv1400c重组质粒，然后将构建的重组质粒转化到BL21（ DE3）表达菌株中，增菌后用IPTG进行诱导表达再用亲和层吸树脂法进行纯化，利用不同底物、不同pH、不同温度对纯化后的Rv1400c酯酶进行活性分析。结果表明：成功构建出pET28b－Rv1400c重组质粒；SDS－PAGE和Western blot显示，Rv1400c以包涵体形式表达，蛋白分子质量为39 ku；在对8种底物的筛选中发现Rv1400c在C2～C14中具有活性，其中以在C2中活性最好；在以C12为底物、pH 8?0、37℃条件下酯酶活性最高。
结核分枝杆菌酯酶Rv1400c、pET28b-Rv1400c重组质粒、包涵体、酯酶活性
S852.61(动物医学（兽医学）)
国家国际科技合作专项2011DFA32900;国家自然科学基金项目31100659，31272538;国家重点基础研究发展计划项目[973计划2012CB518801]，长春市科技局项目长科技合2011239
2015-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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