玉米自交系SSR标记技术的优化?

摘要：

选用7个玉米自交系为材料，分别研究了PCR反应体系中Mg2＋浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶量、引物浓度、模板DNA量，退火温度，PCR产物变性处理及银染方法对玉米自交系SSR标记结果的影响，优化了玉米自交系SSR标记技术。结果表明：优化后的20μL PCR反应体系为1?5 mmol／L Mg2＋、0?05 mmol／L dNTPs、0?5 U Taq DNA聚合酶、0?05μmol／L引物、10倍PCR buffer 2?0μL和80 ng模板DNA，最优退火温度为60℃。 PCR产物在95℃条件下变性5 min后上样电泳，电泳结束后胶板用蒸馏水快速漂洗，洗后用0?1％的硝酸银溶液银染8 min，再用蒸馏水洗30 s，最后用3％氢氧化钠与1％甲醛显影。

关键词：玉米、自交系、PCR反应条件、退火温度、染色方法

分类号：S513.032(禾谷类作物)

资助基金：吉林省主要作物分子标记辅助育种技术平台建设，农业部“948”高效作物分子育种体系核心技术引进2013－Z47

在线出版日期：2015-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：653-659