大豆查尔酮还原酶GmCHR基因的克隆及其在烟草中的表达?

摘要：

以大豆品种“吉农28”为材料，利用RT－PCR技术获得GmCHR基因序列，并选择其中918 bp的开放阅读框，以pBI121为基础载体，构建了由35S启动子驱动的GmCHR植物表达载体，转入烟草中并对17株抗卡那霉素的转基因烟草进行PCR、GUS染色、Southern杂交检测，对植株中GmCHR基因mRNA表达量进行荧光定量PCR检测，采用高效液相色谱技术测定转基因植株中查尔酮还原酶催化产物异甘草素的含量。结果表明：GmCHR基因成功整合到烟草基因组中并能够成功表达；在转基因植株中目的基因的mRNA均有表达，且不同植株间表达量存在差异；转化烟草叶部组织中异甘草素的平均含量为（7?528±0?018）μmol／g，而转空载体烟草中未检测出异甘草素。

关键词：大豆、查尔酮还原酶、基因克隆、烟草

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31171568

在线出版日期：2014-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：546-553