牛FADD基因过表达和 RNAi载体构建及在牛胎儿成纤维细胞中的表达
FADD（Fas-associated death domain protein）存在于 Fas/FasL系统中，是信号传导通路的一个信号连接蛋白，FADD通过传递凋亡信号，从而介导细胞凋亡。为进一步验证FADD基因抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的作用，从牛卵巢组织中扩增 FADD基因，将 FADD基因连接到带有绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pAcGFP-N1中，构建过表达FADD基因载体，并构建FADD基因的RNAi载体；用脂质体介导法将FADD基因RNAi载体、真核表达载体转染到牛胎儿成纤维细胞中，观察有无荧光的表达，并使用 Real-Time qPCR和West-ern blot方法检测FADD基因mRNA、蛋白水平的表达情况。结果表明：成功构建出FADD基因RNAi载体和高表达载体，重组质粒转染牛胎儿成纤维细胞24 h后在荧光显微镜下可观察到绿色荧光，转染效率可达50％。
FADD、RNAi载体、pAcGFP-N1、牛胎儿成纤维细胞
S823.2(家畜)
国家“863”计划项目2013AA102505;国家自然科学基金项目31000991;教育部新教师基金项目2010061120039
2014-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
199-204,212
