利用慢病毒表达载体干扰梅花鹿角柄骨膜细胞P21基因
利用慢病毒干扰系统,对东北梅花鹿角柄骨膜干细胞(PP细胞)P21基因进行干扰。结果表明:筛选出的2条针对梅花鹿P21基因的siRNA与载体质粒PLVTHM连接成功,并与pMD2.G、pCMV-dr8.9质粒共转染到293t细胞,获得重组慢病毒;通过感染PP细胞并利用流式细胞仪进行分选,获得了纯度90%以上的感染细胞;荧光定量RT-PCR检测表明P21基因的mRNA水平大幅度下调,干扰效率达到70%。表明成功干扰了P21基因在PP细胞中的表达,获得了低表达P21的PP细胞系。
鹿茸再生、P21 基因、RNAi、角柄骨膜、慢病毒表达载体
Q75;S825(分子遗传学)
“973”前期研究专项2011 CB111515;吉林省自然科学基金项目20101575
2014-02-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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