森林脑炎病毒E基因DomainⅢ段的克隆表达及鉴定

摘要：

从森林脑炎病毒森张株的细胞培养液中提取总RNA,通过RT-PCR扩增E蛋白基因DomainⅢ段,克隆入原核表达载体GSTpET-30a(+)中,构建重组原核表达质粒,用IPTG诱导表达.表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化后,进行Western blot鉴定,并用针对不同病毒的兔免疫血清验证其检测特异性.重组原核表达质粒GSTpET-30a-ED3经酶切证明构建正确.表达的重组蛋白相对分子质量约为41 kD,主要以包涵体的形式表达,并可与TBE阳性兔免疫血清特异性反应.结果表明:成功克隆了森林脑炎病毒森张株E蛋白基因DomainⅢ段,并在大肠埃希菌BL21 (DF3)中表达,获得的ED3蛋白质具有良好的特异性.

关键词：森林脑炎病毒、E基因、克隆表达

所属期刊栏目：34

分类号：S855;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重大专项项目2011zx10004-001

在线出版日期：2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：667-671