猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定

摘要：

克隆了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CC-11株的N基因全序列,将其克隆至原核表达载体pET28a,转化E.coli Rosetta株后经0.5 mmol/L IPTG诱导,获得了高水平表达.对表达的N蛋白进行纯化,以50 μgN蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,通过间接ELISA筛选,获得9B12、7C2、7C6共3株稳定分泌抗PRRSV-N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,亚型鉴定结果分别为IgG2b、IgG1、IgG1亚型.通过Western blot分析和间接免疫荧光测定表明,3株单抗对PRRSV CC-11株、CH-1R和JXA1-R细胞毒以及4份临床疑似病料均发生特异性反应.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、N蛋白、单克隆抗体

所属期刊栏目：34

分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)

资助基金：农业部公益性行业项目201203056

在线出版日期：2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：661-666