乳酸乳球菌同源整合载体的构建及鉴定

摘要：

构建乳酸乳球菌同源整合载体,实现外源基因在乳酸菌中的同源重组和转入.PCR扩增红霉素抗性基因,连接到T载体中,构建载体pMDE;根据乳酸乳球菌Lactococcus lactis 1.2472全基因组中usp基因序列设计引物,PCR扩增usp基因两端的同源重组臂LB和RB基因序列,PCR产物经回收后,克隆至pMDE载体中,获得同源重组载体pMDELR,电转化至Lactococcus lactis 1.2472感受态细胞中,挑选阳性克隆,采用PCR和SDS-PAGE方法进行鉴定.结果表明:成功扩增同源重组臂LB和RB,红霉素抗性基因替换了乳球菌中的usp基因,整合到了乳球菌基因组中.

关键词：乳酸乳球菌、usp基因、同源重组、表达载体

所属期刊栏目：34

分类号：S852.61;Q782(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目81001342;军内"十一五"科技攻关项目06G127;吉林省高新技术产业发展项目2010;长春市科技特派员行动计划项目

在线出版日期：2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：628-633