四翅滨藜BADH基因的克隆、序列分析及其原核表达
摘 要:在构建四翅滨藜(Atriplex canescens)全长cDNA文库中通过随机克隆测序并进行FST分析基础上,得到1个四翅滨藜甜菜碱醛脱氢酶(betaine aldehyde dehydrogenase,BADH)的cDNA序列,命名为AcBADH.AcBADH cDNA包含1个长度为1 500bp的完整开放阅读框,编码500个氨基酸,属于ALDH-SF超家族,其核酸序列与中亚滨藜的BADH基因的同源性为98%,对应编码氨基酸序列同源性为99%.将得到的序列提交GenBank(登录号:JF776157).与其他植物BADH的氨基酸序列比对,AcBADH具有相同功能区域,包括N-端信号肽,底物结合及酶催化位点,因而推测可以参与甜菜碱的合成反应.对AcBADH与其他植物BADH的氨基酸序列的进化分析表明,AcBADH与鞑靼滨藜、中亚滨藜的亲缘关系较近.将AcBADH基因与原核表达载体pET28a连接,进行融合表达,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达出分子质量约58 kD的蛋白.
四翅滨藜、甜菜碱醛脱氢酶、基因克隆、序列分析、原核表达
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Q785;Q786(基因工程(遗传工程))
农业部转基因生物新品种培育重大专项2009ZX08009-062B
2013-03-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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