猪干扰素α1与胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立
依据GenBank已发表的猪干扰素α1(poIFN-α1)成熟肽基因序列,胸腺肽α1(THY-α1)蛋白序列及Escherichia coli B密码子使用频率表,优化并人工合成poIFN-α1和THy-α1基因,利用SOE - PCR法在poIFN-α1和THY-α1之间设计1个13肽Linker.将融合基因克隆至pRSFDuet-1表达载体,转化BI21(DE3)感受态,37℃培养至菌液OD600为0.6~0.8,IPTG(0.5 mmol/L)诱导,20℃培养12 h,SDS- PAGE和Western blot鉴定.结果表明:目的蛋白为菌体内可溶性表达,经强阴离子交换层析和疏水层析纯化获得高纯度poIFNα1-THYα1融合蛋白.
猪、干扰素α1、胸腺肽α1、融合蛋白
34
S828;Q786(家畜)
吉林省科技支撑计划重点项目3D510S086604
2012-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
449-453