2种PCR方法扩增大豆rbcS启动子5'侧翼序列比较
比较了扩增已知序列5’侧翼序列的2种PCR方法.方法一是反向PCR (IPCR),以大豆基因组酶切后的DNA片段自身环化产物做模板,用2对特异引物反向扩增大豆rbcS启动子5'侧翼序列.方法二是热不对称交错PCR(rAIL- PCR),以大豆基因组DNA为模板,用3个巢武特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR循环.IPCR和TAIL- PCR 2种试验方法分别扩增获得438 bp和867 bp特异产物.经测序发现:2片段两侧均含有设计的引物,其部分序列均与已知序列相一致,两者也有部分序列完全相同,但TAIL- PCR技术简单,重复性好,能够在短时间内获得目标片段,TAIL-PCR技术在克隆侧翼序列时优于IPCR.
反向PCR、热不对称交错PCR、大豆、rbcS启动子
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Q78;S565.1(基因工程(遗传工程))
国家转基因生物新品种培育重大专项2008ZX08010-002;吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目吉教科合字2009第61号
2011-12-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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