微小毛霉凝乳酶的分泌表达、产物纯化及鉴定

摘要：

采用基因工程的方法对微小毛霉(Mucor pusillus)凝乳酶进行分子改造，获得适于乳品工业生产用的凝乳酶，克隆到了微小毛霉凝乳酶基因，构建了酵母表达质粒pPIC9K/M。线性化后电击转入毕赤酵母GS115，在甲醇诱导下进行凝乳酶的初步发酵试验，通过pH反应及酶抑制反应试验证明，重组凝乳酶获得了分泌表达。SDS-PAGE分析表明重组凝乳酶的分子量约为46kD，与理论值(45.3 kD)基本相符，培养基上清液中凝乳酶的活性为311.8 U/mL，纯化的总回收率为51.89％，纯度达到92％。

关键词：凝乳酶、分泌表达、毕赤酵母

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分类号：TS201.3(食品工业)

资助基金：国家“863”计划项目2006AA10Z306;现代农业产业技术体系建设专项农科教发200714号

在线出版日期：2011-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：395-398,417