生长抑素shRNA的慢病毒包装及对生长抑素的抑制作用

摘要：

采用幔病毒(LV)载体介导siRNA感染宿主细胞,研究其对内源性生长抑素(Somatostatin,SS)的抑制作用.首先将筛选出的psh2与辅助质粒共转染293T细胞包装获得假病毒颗粒LV-sh2,同时,包装产生LV-sh0和LV-GFP作为阴性对照.超速离心,梯度稀释法测定病毒滴度,结果提示所构建的重组病毒滴度约为6×107ifu/mL.病毒感染BHK-21细胞,通过荧光显微镜观察到了GFP的高效表达,在感染细胞的基因组中PCR检测到了病毒基因,表明病毒感染获得了高效的基因转移和表达效率.荧光定量PCR和RIA检测表明,LV-sh2对内源性SS的mRNA和蛋白质水平均有显著的抑制作用(86.49%和78.80%,P＜0.05).

关键词：生长抑素、shRNA、幔病毒载体、基因沉默

所属期刊栏目：33

分类号：Q575;S813.24(激素)

资助基金：吉林大学农学部人才引进建设项目4305050102J4

在线出版日期：2011-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：327-331