大肠杆菌多重耐药调控基因marA的克隆及其原核表达
根据GenBank中大肠杆菌的marA基因序列设计引物,以大肠杆菌ATCC25922的基因组为模板,PCR扩增出约384 bp的marA基因片段,将所得片段与pMD18-T simple vector连接,转化至JM109大肠杆菌中,筛选阳性克隆,其质粒中插入序列测序结果与GenBank中报道一致.从阳性克隆中提取质粒,经BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶解,回收384 bp目的片段,定向克隆到pET-28a表达载体中,提取质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,获得阳性克隆.经IPTG诱导阳性菌,收集表达产物,通过SDS-PAGE分析证实marA基因得到表达.
大肠杆菌、marA基因、克隆、原核表达
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Q785;S852.61(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金项目30400326;吉林省科技发展计划项且20010538,20030425,20050124;吉林省教育厅项目2005042
2009-09-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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