鹅源副黏病毒NA-1株F基因定点突变及其在Bac-to-Bac系统中的表达
根据已发表的鹅源副黏病毒(GPMV)NA-1株F基因序列设计2对引物,引物中含有突变位点,分3次扩增F基因片段,从而得到目的基因片段,再利用酶切位点将基因片段与转座载体pFastBac1连接,获得重组质粒,命名为pFastBac1-F',从而使改造后的F'基因编码的氨基酸裂解位点为112Gly-Arg-Gln-Gly-Arg-Leu117.并将pFastBac1-F',进行测序鉴定后转化到DH10Bac宿主菌,将目的基因定向插入到Bacmid质粒中,经筛选获得的重组Bacmid F'转染Sf9昆虫细胞,并进行表达检测.结果,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot检测获得蛋白特异条带,相当分子量约63kD.
鹅源副黏病毒、F基因、定点突变、表达
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S852.65(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金项目30571375
2008-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
348-351,355