乙脑病毒E蛋白中和表位与结核杆菌hsp70 在大肠杆菌中的融合表达
根据大肠杆菌偏嗜性密码子原则,人工合成了乙脑病毒E蛋白C末端的中和表位,位于E蛋白上373~399 aa,通过Eco RⅠ和HindⅢ连接构建原核表达载体pET-32a-epitope.将hsp70通过HindⅢ和Xho Ⅰ连接到载体pET-32a-epitope上中和表位的3端,构建融合表达载体pet-32a-epitope-hsp70.诱导表达后,将上清和沉淀分别进行SDS-PAGE,结果表明该融合蛋白以包含体形式存在.将包含体在8 mol/L的尿素中过夜溶解,然后将上清过柱,获得良好的纯化结果.融合蛋白的分子量为94 kD.Western blot显示该蛋白兼具对JEV和结核杆菌热休克蛋白70(M.T hsp70)的特异抗原性.
乙脑病毒E蛋白中和表位、大肠杆菌、结核杆菌hsp70、融合、包含体
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Q786;S852.6(基因工程(遗传工程))
上海市农业"四新"技术推广项目沪农科推字2005第3-4号
2008-06-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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