HCV NS5B蛋白表达、纯化及活性测定

摘要：

以HCV cDNA为模板,设计特异性扩增引物,PCR得到编码NSSB的基因,与PET-21a质粒连接,构建重组质粒.重组质粒转化入大肠杆菌Rosetta菌株,加入IPTG(终浓度0.5 mmol/L),30℃、5 h诱导表达.连续通过Ni-NTA柱、SP阳离子交换柱纯化蛋白,1 L菌液可得到1.2 mg蛋白.体外活性测定结果表明,所得蛋白具有RdRp功能,酶对底物UIP的Km值为2.06 μmol/L.

关键词：HCV、NS5B蛋白、表达、纯化、活性测定

所属期刊栏目：30

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30070563

在线出版日期：2008-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：154-156