FPV 4b核心蛋白基因的克隆及其探针制备

摘要：

利用PCR方法成功克隆了FPV 4b核心蛋白基因1 361 bp片段.序列分析表明:该序列与模板DNA(AF198100)的碱基序列同源性为99.5%,只有7个碱基差异(第215位C→A,第386位T→A,第388位G→A,第1 014位T→G,第1 034位T→G,第1 137位C→T,第1 143位A→G).回收FPV 4b核心蛋白基因1 361 bp片段与pMD18-T载体相连构建重组质粒pMD18-T-4b,用EcoRⅠ酶切pMD18-T-4b后得到1个约360 bp大小的DNA片段,以其为模板制备了地高辛标记的DNA探针.对新标记的探针进行标记效率检测,结果显示其标记效率为100 mg/L.敏感性检测表明,该探针对同源DNA的检出限量为10 pg.特异性检测结果表明,用本试验所标记的探针对提取的FPV 282E4和FPV JL株DNA、重组质粒pMD 18-T-4b进行检测结果均呈阳性,而鸡马立克氏病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、CEF的核酸提取物均呈阴性,说明该探针具有较强的特异性.

关键词：鸡痘病毒、4b核心蛋白基因、克隆、基因探针

所属期刊栏目：28

分类号：S852.659(动物医学（兽医学）)

资助基金：高比容电子铝箔的研究开发与应用项目101-05-03-01;军队杰出人才基金01Q127

在线出版日期：2006-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：440-443