蚓激酶基因乳腺表达载体构建及在牛乳腺中的瞬时表达

摘要：

在稀有密码子的改造基础上,人工合成了849 bp的蚓激酶F-Ⅲ-1全长cDNA序列,并以其为目的基因,构建了以山羊β-酪蛋白启动子为上游调控序列的乳腺组织特异性表达载体pBLK和pLN-bCP-LK.2种质粒分别以200,500,1 000,2 000 μg的剂量梯度注入泌乳期黑白花奶牛乳腺,以纤维蛋白平板溶圈法(FAPA)检测该基因表达后奶样的纤溶活性.结果表明:注射后3～78 h,奶样有明显纤溶活性,其中6～16 h活性最高.500 μgpBLK质粒与其他3个剂量溶圈直径之间差异显著(P＜0.05),而其他3个剂量之间差异不显著;pLN-bCP-LK质粒的各剂量溶圈直径之间差异均不显著,且2种质粒的同剂量溶圈直径之间差异也不显著.以上结果表明,改造后的蚓激酶基因可以在泌乳期黑白花奶牛乳腺中实现瞬时表达,以500 μg的注射剂量表达效果最佳.

关键词：蚓激酶、瞬时表达、乳腺、稀有密码子

所属期刊栏目：28

分类号：S813.3(普通畜牧学)

资助基金：国家科技攻关项目2002AA206653

在线出版日期：2006-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：208-211,221