表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒构建与包装

摘要：

为构建表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒,用Mlu Ⅰ和Sph Ⅰ双酶切真核表达载体pVAXLPN,获得CDV N基因表达盒,将CDV N基因表达盒克隆入预先用SspⅠ酶切后的线性化质粒pVAX△F3中,构建含CDV N基因表达盒的转移质粒pVAX△E3LPN.用NruⅠ和Sal Ⅰ双酶切转移质粒pVAX△F3LPN,回收E3区部分缺失的含CDV N基因表达盒的目的片段,定向克隆入同样酶切处理含CAV-2全基因组的质粒载体ppoly2-CAV-2中,构建E3区部分缺失的包含CDV N基因表达盒的重组质粒pCAV-2-CDVLPN.重组质粒pCAV-2-CDVLPN经Asc Ⅰ酶切获得线性化基因组CAV-2-CDVLPN.此基因组与Nru Ⅰ扣SalⅠ分别酶切CAV-2 SY基因组获得的片段混合,利用脂质体介导共转染MDCK细胞,重复转染3次后,出现典型CAV-2病变,经电镜观察和酶切鉴定,证明表达犬瘟热核蛋白的重组犬2型腺病毒包装成功.

关键词：犬瘟热病毒、核蛋白(N蛋白)、犬腺病毒、重组病毒

所属期刊栏目：27

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：解放军医学科研项目01-Z-092

在线出版日期：2005-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：543-548