嗜水气单胞菌喹诺酮类药物抗性决定区基因片段的克隆与突变分析

摘要：

将分离到的4株对环丙沙星、诺氟沙星和氧氟沙星等喹诺酮类药物耐药的嗜水气单胞菌、2株敏感菌,进行旋转酶基因A亚单位(gyrA)喹诺酮抗性决定区基因(QRDR)PCR扩增.引物序列A1:AGAGTTCCTATCTTGATTACG;A2:CTGTGATGTAGGTCATCAACT,在gyrA基因中的位置分别为53～73和620～640.PCR扩增后,将扩增产物克隆到pMD-18T载体,酶切鉴定后测序.用DNA star软件分析比较其蛋白序列,发现4个氨基酸突变位点,分别是83位点的Ser-Ile(4株耐药菌),92位点的Leu-Met(4株耐药菌),174位点的Ile-Phe(3株耐药菌),202、203位点的Asn、Leu-Asp、Arg(3株耐药菌,另1株Leu未突变), 83位点的突变与大肠杆菌等一致,122位点具有保守的Try,耐药菌突变后的氨基酸残基分子量均比对应增大.4株耐药菌、2株敏感菌的喹诺酮抗性决定区基因片段序列已登录GenBank,注册号 AY039655,AY039656,AY138539,AY138540,AY138537,AY138538.

关键词：嗜水气单胞菌、氟喹诺酮药物、gyrA基因、突变

所属期刊栏目：25

分类号：S853.74(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30070587;吉林省自然科学基金20020648

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：94-96,101