人源蛋白激酶B的原核表达研究

摘要：

确定人源PKB在大肠杆菌中的表达条件.方法构建PKB原核表达质粒pET-28-PKB,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,通过改变诱导剂IPTG浓度、诱导时间、诱导温度和菌体浓度确定了PKB的最佳表达条件,并初步纯化PKB蛋白.结果确定了重组菌株的最佳表达条件为:37℃、200 r/min培养2h后,28℃、1 mmol/L IPTG诱导培养8h.超声破碎菌体,经8M尿素变性、12 000 rpm/min离心和亲和层析,获得了纯化的PKB.结论为PKB蛋白的表达纯化建立了可行性的技术方案.

关键词：PKB、原核表达、纯化

所属期刊栏目：30

分类号：Q812(生物工程学(生物技术))

资助基金：吉林化工学院资助项目吉化院合字[2009]第67号

在线出版日期：2013-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：106-109