重组人角质细胞生长因子-2基因的克隆、表达及活性

摘要：

从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA,利用RT-PCR法获得人角质细胞生长因子-2(hKGF-2)cDNA,并通过PCR方法扩增,再与原核表达载体pET3c连接后转化至BL21(DE3)宿主细胞中获得表达菌株.通过流加补料方式和发酵条件的控制,进行高密度培养,并通过IPTG诱导获得可溶性表达的目的产物.结果表明:目的蛋白占菌体总蛋白的30.0%以上; 经阳离子交换层析、肝素亲和层析两步柱层析方法获得的rhKGF-2纯度高于99.0%.建立了利用转受体FGFR2-Ⅲb的BaF3细胞株进行rhKGF-2促增殖作用的活性测定方法,活性测定结果呈典型的S型曲线,并在一定范围内具有剂量依赖性.

关键词：重组角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)、高密度培养、柱层析、转受体FGFR2-Ⅲb、BaF3细胞株、生物活性

所属期刊栏目：49

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省教育厅"十一五"科技发展规划项目吉教科合字2009第65号;长春市应用技术计划研究项目08YZ45;2009年科技型中小企业技术创新基金09C26212203306

在线出版日期：2012-02-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1150-1156