结核分枝杆菌H37Rv异柠檬酸裂解酶基因的克隆表达及活性

摘要：

以结核分枝杆菌H37Rv基因为模板,PCR反应扩增该菌株的异柠檬酸裂解酶基因(ICL),将其克隆入原核表达载体pET28b中,并将pET28b-ICL转化入大肠杆菌BL21( DE3)中进行诱导表达.结果表明,ICL蛋白的最佳诱导表达条件为:温度20℃,IPTG终浓度为0.25 mmol/L,诱导表达4h,在此条件下ICL实现了高效表达,以镍离子螯合型琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化ICL蛋白,纯化程度较高.酶学性质鉴定表明,实验获得了具有生物学活性的重组蛋白,重组ICL的比活力为24 μmol/( mg·min).

关键词：结核分枝杆菌、异柠檬酸裂解酶、基因表达

所属期刊栏目：49

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省科技发展计划项目2008110

在线出版日期：2011-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：777-781