3种方法提取菠萝蜜叶片和种子总RNA的比较

摘要：

为了筛选最适的菠萝蜜总RNA提取方法,采用Trizol提取法、Tris-硼酸提取法和试剂盒提取法提取菠萝蜜叶片和种子总RNA,通过紫外分光光度计检测、琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR检测以及Agilent2100检测,对提取结果进行比较分析.结果表明:采用这3种方法均能从菠萝蜜叶片和种子中提取到总RNA,Tris-硼酸提取法较其他2种方法所提取的总RNA产率高,但杂质较多;采用Tris-硼酸提取法能提取完整性较好的总RNA,28S、18S和5S清晰可见,但提取质量较试剂盒提取法差;试剂盒提取法省时省力,有明显的28S和18S条带,A260/A280分布在1.92～1.98,A260/A230分布在2.04～2.09,叶片总RNA产率42.3 ng/μL,种子总RNA产率15.6 ng/μL.RT-PCR检测结果表明在约200 bp处存在清晰整洁的电泳条带,Agilent 2100检测结果显示杂峰极少,28S峰积分面积约是18S峰积分面积的2倍.经综合评定认为,试剂盒提取法是适合菠萝蜜叶片和种子总RNA提取的方法.

关键词：菠萝蜜、叶片、种子、总RNA

所属期刊栏目：37

分类号：S667.8(果树园艺)

资助基金：广西自然科学基金项目2016GXNSFAA380164;广西亚热带作物研究所基本科研业务费专项项目桂热研 201801;广西亚热带作物研究所基本科研业务费专项项目桂热研 201807;广西亚热带作物研究所基本科研业务费专项项目桂热研 201905

在线出版日期：2019-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：89-94