结核分枝杆菌Rv1400c多抗制备及反应原性分析
将pET28b-Rv1400c重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选出阳性菌株并增菌培养后IPTG诱导表达,离心后沉淀用SKL变性溶解,用亲和层吸树脂纯化Rv1400c蛋白,通过SDS-PAGE和Western-blot分析目的蛋白表达与纯化情况;利用Rv 1400c蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体;Western-blot分析鹿结核阳性血清的反应情况.SDS-PAGE和Western-blot结果显示:Rv1400c以包涵体形式表达,蛋白分子质量为39 ku;目的蛋白免疫新西兰兔后,ELISA检测血清效价达到1∶51 200.纯化的Rv 1400c重组抗原蛋白能与鹿的阳性血清发生体外结合反应.
结核分枝杆菌、Rv1400c、包涵体、复性、反应原性
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S852.61+8(动物医学(兽医学))
国家国际科技合作专项2011DFA32900,国家自然科学基金项目31100659,31272538,国家重点基础研究发展计划[973计划2012CB518801],长科技合2011239
2015-04-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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