鹅细小病毒VP2和VP3蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及验证

摘要：

为筛选与鹅细小病毒VP2和VP3蛋白相互作用的鹅胚成纤维细胞蛋白,构建VP2和VP3蛋白的诱饵载体pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3.从pGEX-4T-VP1质粒中PCR扩增VP2和VP3基因,克隆至pMD-18T载体中,经测序验证鉴定后定向克隆到酵母双杂交载体pGBKT7中.将2个重组诱饵载体经PCR、酶切和测序验证后分别转化酵母菌H2YGold中,检测其在酵母细胞中有无自激活和毒性作用.结果表明:成功构建了pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3诱饵载体,且其对报告基因无自激活作用,对酵母细胞无毒性.由此说明,诱饵载体pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3可用于酵母双杂交系统筛选与VP2和VP3蛋白相互作用的细胞结合蛋白.

关键词：鹅细小病毒、VP2和VP3蛋白、酵母双杂交

所属期刊栏目：18

分类号：S852.65+7(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2014-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：77-80