轮状病毒重组非结构蛋白NSP486-175蛋白的表达及其致泻能力的研究

摘要：

目的:构建轮状病毒重组NSP486-175表达蛋白,对其致泻能力进行初步评价.方法:从轮状病毒SA11病毒株中提取RNA,逆转录为cDNA,利用PCR技术扩增目的基因并制备E.coli DH5α感受态细胞,酶切pMD19T-NSP4,pMD19T-NSP486-175质粒和pET28a(+)质粒构建轮状病毒重组NSP486-175表达质粒,诱导其表达NSP486-175蛋白,经Gluta-thione SepharoseTM 4B纯化并鉴定.取新生6天乳鼠40只,随机分为四组,每组各10只.第1组腹腔注射0.5 nmol重组蛋白,第2组腹腔注射1.0 nmol重组蛋白,第3组腹腔注射1.5 nmol重组蛋白,第4组腹腔注射生理盐水作为对照组.观察其对小鼠的腹泻和生长发育的影响.结果:第1组的腹泻率为20％,第2组的腹泻率为30％,第3组的腹泻率为70％,第4组的腹泻率为10％,四组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中第3组的腹泻率最高.在体重增长情况方面,在第96小时时,第1组平均增加体重(2.11±0.04)g,第2组平均增加体重(2.06±0.11)g,第3组平均增加体重(1.95±0.15)g,第4组平均增加体重(2.60±1.06)g,四组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:本实验成功重组、表达并纯化出轮状病毒重组非结构蛋白NSP486-175蛋白,证实了其可以引起小鼠腹泻并影响其生长发育.

关键词：轮状病毒、非结构蛋白、NSP486-175、致泻、重组质粒

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资助基金：东莞市社会科技发展项目2016108101021

在线出版日期：2019-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1168-1170