层粘连蛋白α3在膝关节纤维化发生发展中的作用研究

摘要：

目的:观察层粘连蛋白α3(LAMA3)在膝关节纤维化发生发展中的作用并探讨其作用机制.方法:制备兔膝关节纤维化动物模型,HE染色和Masson染色观察术区标本纤维化发展情况,免疫组化检测标本中LAMA3的表达.体外培养成纤维细胞,进行慢病毒转染,构建LAMA3过表达稳定细胞株.EdU染色观察LAMA3对成纤维细胞增殖的影响,Western blot检测LAMA3对细胞增殖相关蛋白的作用;Tunel染色观察LAMA3对成纤维细胞凋亡的影响,Western blot检测LAMA3对细胞凋亡相关蛋白的作用;Western blot检测成纤维细胞过表达LAMA3基因后,Wnt/β-catenin信号通路蛋白Wnt3a、p-GSK、β-catenin的表达;EdU染色观察Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV-939处理后细胞增殖能力的变化.结果:动物实验结果显示,随着术后时间的延长,膝关节纤维化程度加重,LAMA3表达随之增加.细胞实验结果显示,成纤维细胞过表达LAMA3后,细胞增殖能力增强,增殖相关蛋白PCNA和Cyclin D1表达增加.Tunel染色显示,成纤维细胞过表达LAMA3后细胞凋亡数量减少,且凋亡相关蛋白cleaved-PARP、Bax表达下调,而凋亡抑制蛋白Bcl-2表达上调.成纤维细胞过表达LAMA3后,Wnt3a、p-GSK、β-catenin蛋白表达上调,Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV-939处理后,LAMA3促进成纤维细胞增殖的作用明显减弱.结论:LAMA3可以促进成纤维细胞增殖,抑制其凋亡,从而促进膝关节纤维化,Wnt3a/β-catenin信号通路参与成纤维细胞增殖调控过程.

关键词：层粘连蛋白α3、成纤维细胞、膝关节纤维化、增殖、凋亡、Wnt/β-catenin信号通路

所属期刊栏目：36

分类号：R684(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：江苏省自然科学基金BK20201221

在线出版日期：2023-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：446-451