氨基酸分析-同位素稀释质谱法准确定量胱抑素C重组蛋白

摘要：

目的:建立同位素稀释液相色谱串联质谱法进行氨基酸分析,准确定量人重组蛋白胱抑素C(CysC).方法:优化CysC蛋白酸水解条件,将CysC蛋白水解成氨基酸,以水解产物缬氨酸(Val)和苯丙氨酸(Phe)为研究对象,13C5-Val和13C9,15N-Phe为内标,根据括号法分别计算水解产物Val和Phe浓度,从而准确定量CysC蛋白.结果:CysC蛋白在130℃,6 mol/L HCl溶液中水解4 h可完全水解.以水解产物Val和Phe分别计算CysC浓度为1.324 mg/g和1.328 mg/g,一致性较好,检测结果变异系数均小于7%(n=5),取二者平均值得到重组CysC蛋白浓度为1.326 mg/g.结论:成功建立同位素稀释质谱法准确定量重组蛋白CysC的氨基酸分析方法,有望为临床实验室蛋白质检测的溯源提供思路.

关键词：氨基酸分析、同位素稀释质谱法、蛋白定量、溯源

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分类号：O657.7(分析化学)

资助基金：国家重点研发计划2017YFF0205401;国家自然科学基金资助项目81201349

在线出版日期：2017-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：205-208