鼠脂肪干细胞的分离、培养和鉴定
目的：研究脂肪干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）的分离、培养和鉴定的方法，为组织工程、细胞疗法、基因疗法提供可靠的细胞来源。方法：采用反复贴壁法从小鼠脂肪组织中分离、纯化脂肪干细胞，观察其细胞形态，MTT法测定其生长曲线，流式细胞仪对干细胞表面标志物进行鉴定，采用不同诱导液对脂肪干细胞进行诱导，鉴定其多系分化能力。结果：接种后第2 d，大多数呈纺锤形，少数呈三角形、多角形等形状。至第5 d左右，呈成纤维细胞样梭形细胞。至第9～10 d，细胞呈均一的梭形；传代细胞形态与原代细胞类似，但生长速度加快，生长曲线为“S”形曲线。经测定CD90阳性细胞达到96.6%；CD44阳性细胞数达到85.3%；CD11b、CD45阳性细胞均为0.5%。经油红O染色检测，诱导的干细胞胞质中的脂滴被染为红色；碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）染色表现为细胞内灰黑色或黑色颗粒，Von Kossa染色表现为细胞内可见黑色的矿化结节；用阿尔新蓝染色检测，将软骨结节样结构染成蓝色。结论：反复贴壁法可以从小鼠脂肪组织中分离出ADSCs，具备干细胞的各项特征，为干细胞的临床应用提供丰富的干细胞来源。
干细胞、脂肪组织、分离、培养、鉴定
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Q27(细胞生物物理学)
苏州市科技项目基金资助SYS201250。
2016-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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