10.3969/j.issn.1006-2440.2013.01.006
靶向蛋白酪氨酸磷酸酶1B小分子干扰RNA对结肠癌LoVo细胞增殖和成瘤能力的影响
目的:探讨沉默蛋白酪氨酸磷酸酶2B(PTP1B)基因的RNA干扰对人结肠癌LoVo细胞增殖和成瘤能力的影响.方法:应用小分子干扰RNA(siRNA)技术沉默PTP1B的表达(shRNA-PTP1B),采用逆转录聚合酶链反应和Western Blot分别在mRNA和蛋白水平检测抑制效果.CCK-8被用于检测沉默PTP1B表达对肿瘤细胞增殖的影响.在体外实验的基础上建立裸鼠模型,建立稳定表达干扰RNA细胞系,观察干扰RNA稳定表达对人结肠癌裸鼠移植成瘤的影响.结果:shRNA-PTP1B有效沉默LoVo细胞PTP1B mRNA及蛋白的表达,成功筛选shRNA-PTP1B稳定表达细胞株LoVo/shRNA细胞.在体外试验中与对照组比较LoVo/shRNA细胞的增殖能力明显下降.LoVo/shRNA细胞裸鼠移植成瘤体积,明显减小(P均<0.05).结论:shRNA-PTP1B可以沉默人结肠癌PTP1B基因的表达,显著抑制LoVo细胞的增殖,降低LoVo细胞的成瘤能力.
结肠癌、小分子干扰RNA、蛋白酪氨酸磷酸酶1B、蛋白质免疫印迹法、逆转录聚合酶链反应
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R735.3+5(肿瘤学)
2013-06-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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21-23,26