10.3969/j.issn.1006-2440.2008.06.018
中国人长QT综合征HERG基因E505D定点突变及其载体构建
目的:对中国人遗传性长QT综合征2型(LQT2)HERG基因突变E505D进行体外定点突变研究,并构建有基因突变E505D的pCMV-seript/HERG的真核表达载体.方法:采用PCR定点突变技术(重叠延伸法),根据突变位置附近的两个单一限制性内切酶位点(BamH I和EcoR I)设计两对引物,将突变位点设计在引物上,通过PCR扩增,使扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆人pCMV-script载体中.结果:DNA测序结果表明,HERG基因在第1515位由G变成T,发生第505位谷氨酸→天冬氨酸的改变(E505D),定点突变成功.结论:PCR技术介导的定点突变准确、高效.pCMV-script/HERG(E505D)的成功构建,为进一步进行该基因突变的功能研究奠定了基础.
长QT综合征、定点突变、HERG基因
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R541.7(心脏、血管(循环系)疾病)
2009-03-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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