10.3969/j.issn.1006-2440.2007.03.006
APRIL siRNA表达载体构建、微流控芯片筛选及转染优化
目的:构建增殖诱导配体(APRIL)异构体特异性siRNA质粒载体,利用微流控芯片电泳筛选APRIL异构体特异性siRNA表达质粒.方法:以高表达APRIL的人结肠癌细胞株SW480为肿瘤细胞模型,选择APRIL异构体特异性siRNA序列,微流控芯片电泳筛选siRNA表达质粒并经测序后转染SW480细胞,半定量RT-pCR法检测瞬时转染前后SW480细胞中APRILmRNA水平.结果:成功构建hOligo637、hOligo1450、hOligo1534、hOligo1750.微流控芯片电泳成功分辨出被双酶切的插入片段.瞬时转染SW480细胞后均产生特异性的mRNA抑制效应.结论:采用微流控芯片电泳成功筛选出APRIL为靶点的siRNA质粒,并可广泛应用于筛选siRNA质粒.
RNA干扰、增殖诱导配体、质粒载体、微流控芯片电泳
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Q344(遗传学分支学科)
2007-07-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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