PCR-RFLP检测Apo CⅢ基因T-455C多态性的反应条件优化

摘要：

目的:探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)反应体系中各种成分的优化,建立检测载脂蛋白CⅢ(Apo CⅢ)T-455C多态性的方法.方法:采用PCR-RFLP检测ApoCⅢ基因T-455C多态性,同时通过对参与反应体系的成分,在一定范围内设置不同的浓度或参数组,进行正交试验和单因素逐项试验,观测各成分在不同条件下对结果的影响.结果:Apo CⅢ基因检测到3种基因型.PCR反应体系中不同模板含量、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg2+浓度、退火温度和酶切体系中PCR产物量、内切酶量、酶切时间等对反应结果均有不同程度的影响.结论:该研究建立的PCR-RFLP体系检测Apo CⅢ基因T-455C多态性技术,是一种高效快速、简单敏感、准确可靠的分析方法,适合常规实验室开展.

关键词：PCR-RFLP、载脂蛋白CⅢ、反应条件优化

所属期刊栏目：20

分类号：R4(临床医学)

在线出版日期：2006-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：384-388