正、反义β1,4半乳糖基转移酶-Ⅴ表达质粒的构建

摘要：

目的:探讨不同β1,4半乳糖基转移酶-Ⅴ(β-1,4-GalTV)表达水平的生物学意义,构建正、反义β-1,4-GalTV表达质粒.方法:设计β-1,4-GalTV全长引物;提取小鼠脑总RNA,通过RT-PCR方法,得到全长β-1,4-GalTV基因片段,将其克隆到pGEM-T载体.再通过多克隆酶切位点,将β-1,4-GalTV全长序列克隆到pcD-NA 3.1表达载体中.设计反义引物,以pGEM-β-1,4-GalTV质粒为模板,将PCR产物克隆到pcDA3.1表达载体中.通过酶切和测序鉴定构建的质粒.结果:通过酶切和测序证实,得到了正、反义β-1,4-GalTV表达质粒.结论:正、反义β-1,4-GalTV表达质粒的构建,为进一步研究不同β-1,4-GalTV表达水平的生物学意义奠定基础.

关键词：β1、4半乳糖基转移酶-Ⅴ、逆转录-聚合酶链反应、正、反义表达质粒

所属期刊栏目：19

分类号：Q555(酶)

资助基金：江苏省高校高新技术产业发展项目JH02-117;江苏省高校自然科学基金04KJB320114;江苏省社会发展基金BS2004526

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：5-7