原核表达融合蛋白的亲和层析法纯化

摘要：

目的:以T7·Tag Affinity Purification Kit纯化原核表达Tropic1808基因编码的融合蛋白,并进行免疫印迹检测.方法:以0.4mmol/L IPTG诱导含pET-21a-1808重组质粒的BL21(DE3)大肠杆菌,T7·TagAffinity Purifica-tionKit纯化菌体上清液,SDS-PAGE分析,将SDS-PAGE蛋白区带转移至NC膜进行免疫印迹检测.结果:外源性Tropic 1808基因在大肠杆菌中表达的融合蛋白可经T7·Tag Affinity Purification Kit进一步纯化,纯化后的蛋白为单一条带,分子量约为32.0kDa,其免疫印迹反应结果提示该蛋白为Tropic 1808基因编码的融合蛋白.结论:在大肠杆菌中表达的融合蛋白可以免疫亲和法进行纯化和鉴定.

关键词：原核表达、融合蛋白、亲和纯化、免疫印迹

所属期刊栏目：15

分类号：Q5(生物化学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划39425006

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：149-151